重组蛋白A琼脂糖凝胶FF能一次纯化多少血清 IgG，提取蛋白Western内参如何选择？

　

重组蛋白A琼脂糖凝胶FF能一次纯化多少血清 IgG

重组蛋白A琼脂糖凝胶 FF 能一次纯化大量血清 IgG 吗？如用环氧活化的琼脂糖凝胶纯化血清 IgG，先要偶联其相应配基如抗体或蛋白 A 是吗？这里琼脂糖凝胶用环氧活化的意义是什么？
几十毫升如果一次纯化也就用几十毫升的 重组蛋白 A 琼脂糖凝胶 FF 就可以,也可以分两三次纯化,这都没有问题,如果是你想做血清中的抗体纯化也可以把抗原偶联到环氧活化琼脂糖凝胶上, 这样得到的抗体更纯, 一般不选择蛋白 A, 环氧活化便宜,而且相成的键很稳定,没有非特异吸附,是个不错的方法.

提取蛋白Western内参如何选择

适用范围	内参名称	分子量大小	注意事项
胞浆蛋白和总蛋白	beta-actin	43kDa	不适用于骨骼肌样品，细胞生长条件的改变和细胞外基质成分的相互作用可能会改变肌动蛋白的合成
胞浆蛋白和总蛋白	GAPDH	30-40 kDa	一些生理因素例如缺氧症和糖尿病会增强 GAPDH在特定细胞中的表达
胞浆蛋白和总蛋白	Tubulin 微管蛋白	55 kDa	微管蛋白的表达随着抗菌和抗有丝分裂抗性药物而改变
核蛋白	TBP(TATA box binding protein）	38 kDa	不适用于除去DNA的样本
核蛋白	lamin A	74kDa
核蛋白	Lamin B核纤维蛋白	72kDa	不适用于除去核膜的样本
核蛋白	Histon H3
膜蛋白	α-Tubulin	55 kDa
膜蛋白	Na-K ATPase
植物内参	Rubisco核酮糖二磷酸羧化酶
	Lhcb4多抗

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