IgM抗体简介
IgM的研究始于1937年，即用肺炎球菌多糖超免疫的马产生的抗体比典型的兔γ-球蛋白大得多，分子量为990,000道尔顿。IgM是最大的抗体，它是第一个出现在对抗原初始暴露的反应中的抗体。在已经研究过的人和其他哺乳动物的情况下，产生抗体产生的浆母细胞的脾是特异性IgM产生的主要部位。基于IgM的研究，诊断应用，免疫治疗都广泛应用并快速发展。
IgM抗体的纯化方法
IgM有很强的疏水性，可以通过硫酸氨盐析或者疏水层析Butyl Focurose 4FF层析纯化
IgM的分子量很大，比IgG及其它低分子蛋白分子量要大很多，可以凝胶过滤层析 Focurose 6FF层析纯化
IgM也可以用PEG萃取方法纯化
IgM抗体最常用的纯化方法是用IgM Focurose 6HP亲和层析纯化。
IgM抗体纯化工艺
分级盐析（略）
盐析样品的溶解：用0.02M的PB(pH 7.5）溶解含有IgM的硫酸氨沉淀，使溶解后的样品中硫酸氨的含量在0.8M左右，不同来源的IgM可以适当调整。
亲和层析：
|
基质 |
高度交联6%的琼脂糖 |
|
粒径范围 |
25-45µm |
|
平均粒径 |
37µm |
|
结合载量 |
≈5mg(人IgM)/ml(介质) |
|
pH稳定性 |
3-11(长期)
2-13(短期) |
|
化学稳定性 |
所有常用缓冲溶液中稳定
30%异丙醇、70%乙醇、1M醋酸、0.1M NaOH |
|
流速 |
300cm/h |
|
操作压力 |
≤0.3MPa |
|
贮存溶液 |
20%乙醇 |
|
贮存温度 |
4-8℃ |
IgM Focurose 6HP技术参数
层析填料：IgM Focurose 6HP
平衡缓冲液：0.02M PB 、0.8M (NH4)2SO4 ,pH7.5 （平衡缓冲液也可用0.5 M 硫酸钾代替硫酸氨，不同来源IgM缓冲液的盐离子及pH可以适当的调整优化）
洗脱缓冲液：0.02M PB pH7.5（可以适当调整优化）
纯化过程
流速：50cm/h；
平衡：平衡10CV（CV指柱体积，下同）；
上样：上样流速可根据试剂调整；
淋洗：用平衡缓冲液洗10CV；
洗脱：可用平衡缓冲液加洗脱缓冲液连续梯度洗脱
备注：结合效率低，可适当的优化上样缓冲液，降低上样流速。洗脱时线性梯度拉的缓一些利于更好的分离。
条条大路通罗马，到底怎么样的纯化工艺路线是最佳路线呢？没有捷径，这还需要根据IgM的用途及来源，特性进行实验验证，上面只是宏观的纯化思路，请您指正！
