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【学术探讨】使用蛋白A免疫吸附方法快速大量制备痊愈患者体内抗体用于新型冠状病毒肺炎患者的治疗

时间:2020-06-22 22:27 点击次数: 更多 重组蛋白 文章
 新型冠状病毒(2019-nCoV)引发的肺炎疫情仍在持续进展,针对新型冠状病毒(2019-nCoV)的治疗药物难以在短时间内研发出来。已经痊愈的患者,其体内存在大量针对2019-nCoV的特异性抗体,能否提取这些抗体用于治疗?在SARS期间就曾应用康复患者的血浆来治疗感染的病人[1],但在临床推广应用却存在技术困难,一是血浆成分复杂,安全性难以保证;二是需要的血浆量很大,实际难以大量实施该治疗方法[2]。
能否找到一种可以快速大量制备痊愈患者体内特异性抗体的方法?本文从以下几个方面进行探讨。

一、大量的研究及临床应用表明[3,4]:

1、使用针对病毒的特异性抗体,能有效地杀死病毒,是治疗病毒感染疾病的有效方法。从治愈患者体内分离出特异性抗体,再注射到同样病毒感染患者的体内,是最直接、最快速和最有效的治疗方法。
2、已治愈的病毒感染的患者,体内含有大量的针对该感染病毒的特异性抗体,并可持续半年左右的时间。治愈患者淋巴细胞能持续产生特异性抗体,如果能将该抗体分离出来,能很好地应用于同样病毒感染患者的治疗。
3、蛋白A免疫吸附能快速、大量地从治愈患者体内分离出抗病毒特异性抗体,而又不会对该患者造成伤害。

二、蛋白A免疫吸附分离制备免疫球蛋白的原理

1、分离原理:蛋白A免疫吸附柱中的重组蛋白A分子可以选择性结合人体免疫球蛋白,然后通过酸性溶液将免疫球蛋白从吸附柱上洗脱并收集。具体步骤如下:
(1)通过体外循环,将血液从体内导出,经血浆分离器,把血细胞与血浆分开,血浆再经过蛋白A免疫吸附柱,该吸附柱能选择性地吸附血浆中的免疫球蛋白,经过血浆分离器和蛋白A免疫吸附柱后的血浆和血细胞会合后再回输入体内。
(2)被吸附在蛋白A免疫吸附柱上的免疫球蛋白通过酸性缓冲液洗脱下来,收集并中和后,即可获得含抗病毒的特异性免疫球蛋白溶液。
(3)吸附柱用中性缓冲液冲洗并恢复至中性后,可以恢复吸附能力,继续从血浆中吸附免疫球蛋白。
(4)如此循环操作,即可制备大量的免疫球蛋白。
制备过程示意图如下所示:

2、该制备方法的优点:
(1)对人体没有伤害。供体(志愿者)不会丢失除免疫球蛋白以外的任何血液成分,被吸附出来的含有抗病毒特异性抗体的免疫球蛋白,可以通过输入正常人丙种球蛋白得以补充。因此,不会对患者造成伤害。
(2)可以快速、大量制备免疫球蛋白。是目前分离制备免疫球蛋白最好的方法。5-6小时内可以在每个人(志愿者)体内分离出15-20克免疫球蛋白。每个人(志愿者)每周可以分离1-2次,不会对身体造成影响。
(3)和常规收集血浆再制备免疫球蛋白的方法相比,该方法不受血浆量的限制,可以反复多次制备,快速应对疫情需要。
参考文献:
1.    央视新闻客户端 2020年01月30日 01:37。新闻1+1丨康复者是否还会传染别人?专家:有抗体,一般不再传染。http://m.news.cctv.com/2020/01/30/ARTImY8HMZeVbyAYzaxAwRyS200130.shtml.
2.    ”中国科普博览“公众号(kepubolan)。多位新冠肺炎患者治愈出院,为什么不提取他们血液中的抗体用于治疗https://tech.163.com/20/0131/12/F47HSOLV000999LD.html
3.    Luke T, et al. Fully Human Immunoglobulin G From Transchromosomic Bovines Treats Nonhuman Primates Infected With Ebola Virus Makona Isolate. J. Infect. Dis. 2018 11 22;218
4.    Liang MF, et al. SARS Patients-derived Human Recombinant Antibodies to S and M Proteins Efficiently Neutralize SARS-Coronavirus Infectivity. Biomed. Environ. Sci. 2005 Dec;18(6)

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